Антитіла молока і сироватки крові людини: характеристика каталітичної активності та вплив на ріст і виживання клітин

  • Добавили31.07.2012
  • Размер56,5 Kб
  • Скачали5
Сколько стоит заказать работу?

буферу (0,2 М трис-HCl, рН 6,8, 4% Ds-Na, 8% 2-меркаптоетанол, 40% гліцерин) і білки розділяли електрофорезом у 12% ПААГ у присутності 0,1% Ds-Na. Гелі фарбували Coomassie G-250. Аналіз каталітичної активності АТ після розділення гель-фільтрацією за умов дисоціації імунних комплексів (рН-шок).

Препарати АТ піддавали гель-фільтрації на колонці розміром 180 x 5 мм, яка містила Toyopearl TSK HW-55 („Toyo Soda”, Японія). Білки препаратів АТ попередньо осаджували 50% сульфатом амонію й осад розчиняли в 0,1 М гліцин-HCl, рН 2,6 або 50 мМ NaOH. Елюцію білків проводили цими ж розчинами.

Хроматографічні фракції (300 мкл) збирали, нейтралізували і діалізували проти буферу, що містив 20 мМ трис-HCl, pH 7,5, 0,1 М NaCl протягом 18 год. Вміст білків аналізували електрофорезом у градієнті ПААГ (7 - 18,5%) у присутності 0,1% Ds-Na. Для аналізу каталітичної активності від хроматографічних фракцій відбирали аліквоти (30 мкл), додавали 6 мкг субстрату (плазмідна ДНК, гістон Н1) й інкубували 2 год при 37 °С.

Продукти реакції розділяли електрофорезом залежно від природи субстрату. Афінна модифікація білків реакційно здатними аналогами АТР і олігонуклеотидів. Для виявлення АТР - і ДНК-зв'язувальних ділянок на молекулах білків використовували реакційно здатні похідні АТР(ClR-Р-ppA) і [-32P] ATP(ClR-32Р-ppA), а також 32Р-мічений 14-мірний дезоксириботимідилат (ClRCH2NHp(T) 14), які були синтезовані к.

б. н. Якубовим Л.

А. (Інститут хімічної біології і фундаментальної медицини, Новосибірськ, Російська Федерація). Реакційною групою слугувала алкілуюча сполука 4- [(N-2-хлоретил- N-метил) аміно] бензиламін, приєднана до 5 кінцевої фосфатної групи олігонуклеотиду або -фосфату [-32P] ATP (рис.

2). Афінну модифікацію білків (sIgA, rsCD4) проводили у забуференому фізіологічному розчині (ЗФР: 0,14 М NaCl, 10 мМ NaН2РО4, рН 7,5) у присутності 10 мкМ алкілуючого реагенту протягом 45 хв при 37 °С. Конкурентами у реакції слугували: ДНК тимусу теляти, сумарна РНК E.

coli і гепарин у концентрації 1 мг/мл або 30 мкМ d(T) 14. .

Скачать
Реферат Культурология 23.10.2002

Дом и кров в славянофильской концепции

Кафедра философии МСХА Реферат аспирантки кафедры селекции и семеноводства овощных и плодовых культур Кондаковой Ольги по теме Дом и кров в славянофильской концепции. Москва, 1996 Дом относится к числу основополагающих, всеобъемлющих архетипических образов,

Реферат Медицина 22.07.2011

“Розподіл лікарської речовини в органах і тканинах”

Реферат на тему “Розподіл лікарської речовини в органах і тканинах” Внаслідок транспортування (абсорбції) речовини потрапляють у кров, а потім до різних органів і тканин. Вміст вільної (незв язаної) речовини у плазмі крові через певний проміжок часу після

Реферат Медицина 21.07.2011

“Види дії лікарської речовини. Побічна дія лікарських засобів”

Реферат на тему “Види дії лікарської речовини. Побічна дія лікарських засобів” 1. Види дії лікарської речовини Розрізняють пререзорбтивну (місцеву) і резорбтивну дію лікарських речовин. Пререзорбтивна дія - це комплекс ефектів, що виникають на місці застосування лікарського засобу.

Реферат Медицина 21.07.2011

“Функція гемолітичної системи”

Реферат на тему “Функція гемолітичної системи” ПЛАН 1. Склад, функції та значення крові 2. Особливості кровотворення 3. Захворювання системи кровотворення і крові 1. Склад, функції та значення крові Кров – рідка сполучна тканина. Основні функції 1.Дихальна

5ballov.qip.ru рекомендует:

  • Выбор ВУЗа

    С приходом лета начался период, когда выпускники школ выбирают куда пойдут учиться дальше. Конечно, это совсем не легкий выбор, но помочь в выборе может рейтинг вузов на нашем сайте. Также в этом разделе представлена вся нужная для абитуриентов информация.

  • Как сдать ЕГЭ

    Прежде, чем идти в выбранный вуз с документами, нужно сначала получить аттестат, который выдается после сдачи экзаменов. А подготовиться к ним можно в нашем разделе ЕГЭ. Там также представлены варианты за прошлые года.

  • Подготовка к ГИА

    Для девятиклассников не менее важно окончание учебного года. Их также ждет государственная итоговая аттестация. Подготовиться к ней можно на нашем сайте в разделе ГИА. Главное помнить: самоподготовка - это путь к успешной сдаче.

Облако тегов