Антитіла молока і сироватки крові людини: характеристика каталітичної активності та вплив на ріст і виживання клітин

  • Добавили31.07.2012
  • Размер56,5 Kб
  • Скачали5
Сколько стоит заказать работу?

HCl, рН 6,8, 1% Ds-Na, 2% 2-меркаптоетанол, 10% гліцерин) або 10% ТХО. Білки розділяли електрофорезом у 12% ПААГ, або у градієнті 6-16,5% ПААГ у присутності 0,1% DS-Na. Гелі фарбували Coomassie R-250, висушували і піддавали авторадіографії протягом 20 год.

Визначення ліпідкіназної активності. Для аналізу використовували препарати IgG і sIgA різного ступеня очистки. Реакцію фосфорилювання проводили у середовищі, яке містило 20 мM трис-HCl, pH 7,5, 3 мМ MgCl2 і 20 мкКі [g-32P] ATP.

32Р-мічені ліпіди екстрагували розчином хлороформ: метанол (2: 1) і розділяли на пластині Kieselgel 60 у системі хлороформ: метанол: 7М NH40H (60: 35: 5). Пластину висушивали і піддавали авторадіографії. Визначення нуклеазної активності.

Нуклеазну активність імуноглобулінів визначали згідно раніше описаної методики (Shuster et al 1992). Як субстрат використовували надспіралізовану та лінійну форми плазмідної ДНК, тотальну РНК E. coli або рибосомну РНК клітин аденокарциноми людини лінії A549.

Для аналізу зразки, які містили 1-5 мкг білка, інкубували із 3-5 мкг нуклеїнових кислот у 20 мМ трис- HCl, 75 мМ NaCl, 10 мМ MgCl2 протягом 1 год при 37 °С. Ефекторами реакції слугували 0,1-3 мМ АТР або 1 мМ GTP, СТР, TTP, dATP, dGTP, dCTP, dTTP. Продукти реакції розділяли електрофорезом у 1% агарозі у трис-борат-ЕДТА буфері, рН 8,3 у присутності 0,001% бромистого етидію.

Гель фотографували при ультрафіолетовому освітленні. Визначення протеазної активності. Для аналізу протеазної активності АТ субстратами слугували гістони тимусу теляти і цитохром С („Fermentas”, Литовська Республіка).

Реакцію гідролізу проводили у буфері, який містив 20 мМ трис-HCl, pH 7,5 у присутності 3 мг/мл білка і 0,05 - 0,3 мг/мл АТ упродовж 1-3 год при 37 °С. Реакцію зупиняли додаванням у реакційне середовище 4-кратного денатуруючого .

Скачать
Реферат Культурология 23.10.2002

Дом и кров в славянофильской концепции

Кафедра философии МСХА Реферат аспирантки кафедры селекции и семеноводства овощных и плодовых культур Кондаковой Ольги по теме Дом и кров в славянофильской концепции. Москва, 1996 Дом относится к числу основополагающих, всеобъемлющих архетипических образов,

Реферат Медицина 22.07.2011

“Розподіл лікарської речовини в органах і тканинах”

Реферат на тему “Розподіл лікарської речовини в органах і тканинах” Внаслідок транспортування (абсорбції) речовини потрапляють у кров, а потім до різних органів і тканин. Вміст вільної (незв язаної) речовини у плазмі крові через певний проміжок часу після

Реферат Медицина 21.07.2011

“Види дії лікарської речовини. Побічна дія лікарських засобів”

Реферат на тему “Види дії лікарської речовини. Побічна дія лікарських засобів” 1. Види дії лікарської речовини Розрізняють пререзорбтивну (місцеву) і резорбтивну дію лікарських речовин. Пререзорбтивна дія - це комплекс ефектів, що виникають на місці застосування лікарського засобу.

Реферат Медицина 21.07.2011

“Функція гемолітичної системи”

Реферат на тему “Функція гемолітичної системи” ПЛАН 1. Склад, функції та значення крові 2. Особливості кровотворення 3. Захворювання системи кровотворення і крові 1. Склад, функції та значення крові Кров – рідка сполучна тканина. Основні функції 1.Дихальна

5ballov.qip.ru рекомендует:

  • Выбор ВУЗа

    С приходом лета начался период, когда выпускники школ выбирают куда пойдут учиться дальше. Конечно, это совсем не легкий выбор, но помочь в выборе может рейтинг вузов на нашем сайте. Также в этом разделе представлена вся нужная для абитуриентов информация.

  • Как сдать ЕГЭ

    Прежде, чем идти в выбранный вуз с документами, нужно сначала получить аттестат, который выдается после сдачи экзаменов. А подготовиться к ним можно в нашем разделе ЕГЭ. Там также представлены варианты за прошлые года.

  • Подготовка к ГИА

    Для девятиклассников не менее важно окончание учебного года. Их также ждет государственная итоговая аттестация. Подготовиться к ней можно на нашем сайте в разделе ГИА. Главное помнить: самоподготовка - это путь к успешной сдаче.

Облако тегов